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潔凈室氣浮細(xì)菌如何檢測?
2020-05-26 瀏覽次數(shù):468
潔凈室氣浮細(xì)菌的檢測主要有兩種方法:一種是自然沉降;另一種是強制濺射。主要參考的標(biāo)準(zhǔn)是《醫(yī)藥工業(yè)潔凈室(區(qū))浮游菌的測試方法》(GB/T 16293-1996)和《醫(yī)藥工業(yè)潔凈室(區(qū))沉降菌的測試方法》(GB/T 16294-1996)。沉降法的采樣時間較長,速度較慢;濺射法的采樣時間較短,速度較快。兩種檢測方法得到的數(shù)據(jù)雖然相關(guān),但并不等同。前者測得的是一定的時間內(nèi)平均沉降到每個培養(yǎng)皿中的細(xì)菌個數(shù),后者測得的是1m3的空氣中的細(xì)菌的個數(shù)。
1、需要的器材設(shè)備
氣浮細(xì)菌濃度的檢測除需要氣浮細(xì)菌采樣器外,還需要高溫高壓滅菌器、細(xì)菌培養(yǎng)皿、細(xì)菌培養(yǎng)基、恒溫恒濕細(xì)菌培養(yǎng)箱、放大鏡、生物顯微鏡等。
2、檢測操作
(1)采樣前的準(zhǔn)備
1)將培養(yǎng)皿通過121℃濕熱滅菌20min或180℃干熱滅菌2h。
2)將培養(yǎng)基加熱熔化,冷至45℃,在無菌操作條件下,將約60mL培養(yǎng)基注入直徑為150mm的培養(yǎng)皿中。
3)有培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿宜在2~8℃的環(huán)境中存放。
(2)細(xì)菌的采集
1)準(zhǔn)備采樣器材時應(yīng)在5級潔凈環(huán)境中進行。
2)對氣浮細(xì)菌采樣器進行清潔滅菌處理,防止采樣器上的細(xì)菌脫落進入培養(yǎng)皿中產(chǎn)生檢測誤差。
3)將采樣器的氣流量調(diào)節(jié)到標(biāo)準(zhǔn)量值。
4)將帶有培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿置于采樣器的轉(zhuǎn)盤上,并取下培養(yǎng)皿的上蓋。將培養(yǎng)皿的上蓋正置于潔凈的環(huán)境中。
5)蓋上采樣器的透明罩,將濺射距離調(diào)節(jié)到標(biāo)準(zhǔn)量值。
6)選取采樣點。采樣點離回風(fēng)口的距離應(yīng)不小于1m,采樣點離地0.8~1.5m(略高于工作面)
7)根據(jù)預(yù)計的細(xì)菌濃度確定采樣量,根據(jù)采樣量和氣流量選定采樣時間,然后開機采樣。
(3)細(xì)菌的培養(yǎng)
1)采樣器采樣結(jié)束后,在5級潔凈環(huán)境中開啟采樣器的透明罩。蓋上培養(yǎng)皿的上蓋,將培養(yǎng)皿置于細(xì)菌培養(yǎng)箱中。
2)細(xì)菌培養(yǎng)的溫度為30~35℃,細(xì)菌培養(yǎng)的時間不少于48h。
(4)計算細(xì)菌濃度
1)統(tǒng)計培養(yǎng)皿中的菌落數(shù)。
2)氣浮細(xì)菌濃度g按下式計算:
g=1000G/TQ
式中,g為氣浮細(xì)菌濃度,pc/m3
G為培養(yǎng)皿中的菌落數(shù),cfu
Q為氣浮細(xì)菌采樣器的氣體流量,L/min
T為氣浮細(xì)菌采樣器的采樣時間,min